金思德生物:实时荧光定量PCR仪 采购要领!

  荧光定量PCR仪在国内市场推广从98年开始已经经历了6年,从开拓者PE(ABI)到ROCHE,再到后来鱼龙混杂。所谓real-time Q-PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

  实时荧光定量PCR仪 采购要领!

  目前购买荧光定量PCR仪系统,一般包括:

  实时荧光定量PCR仪 +实时荧光定量PCR仪 开机检测试剂+通用电脑+自动分析软件

  荧光定量PCR仪 组成:温控模块、光学系统(光源、检测器、光路传导)

  采购要领

  1 温控模块/Peltier:

  普通的Peltier加热方式具有明显边缘效应,均一性差,是上一代的模块PCR加热技术,正处于被淘汰的边缘。

  目前最好的温控模块:银,在金属中银的导热性能较高,升降温速度快,孔间温度均一性好,边缘效应相应减少

  金属的热传导系数表:

  银 429 >铜 401 > 金 317 >铝 237 >铁 80 >锡 67 > 铅 34.8

  另:单一模块升降温速度高并不代表样本升降温速度也高,因此在温控模块升降温速度对比中,最终是要看样本的升降温速度是否快

  最大升降温速度不等与平均升降温速度

  2 光源:

  光强比较:髙强度白光LED > 卤钨灯 >单色LED

  白光LED的亮度约是卤钨灯的3倍左右,单色LED的10倍左右,能够捕捉到更多的荧光信号,是专业光源领域的最新技术代表,2011年开始普遍应用于专业仪器,无论光强、灵敏度与均一性可与上一代氙灯光源媲美,且寿命提升了10倍以上。

  钨灯灯丝本身存在闪烁不稳定的问题,其激发能量远低于白光LED,事实上,无需高端品牌汽车的旗舰概念车,如丰田雷克萨斯,已经开始使用白光LED作为车头灯。

  寿命比较:髙强度白光LED = 单色LED >卤钨灯

  白光LED的寿命长达10000小时以上,一般可以使用5-10年左右,基本上超过了一般科研仪器的正常工作寿命,基本终身无需更换光源,而卤钨灯光源基本每2年就要更换一次,费时费力,南方更是不足一年就要更换一次

  另:卤钨灯每次运行需要半小时预热,其中累计散发的热量对荧光具有明显的淬灭作用。

  3 检测器:

  荧光定量PCR灵敏度:冷CCD >CCD >光电倍增管 CPM >光电二极管

  CCD作为荧光信号的接受器,其质量直接决定了仪器的检测灵敏度和稳定性。

  10℃的冷CCD,和常温CCD有着质的区别,在专业光学领域,冷CCD的造价成本至少要比常规CCD高出一倍以上。冷CCD在更低的温度下进行光信号捕捉,能够提供更高的光感灵敏度和更低背景噪音。因此,有的荧光定量PCR能够稳定区分1000和2000拷贝的浓度差异,而有的只能做到区分5000和10000个拷贝数。

  4 光路传导:

  光路的传导 光路设计应尽可能有效消除边缘效应,光路设计是否有效消除边缘效应,只有实验才能检验

  检验方法:96/384孔板中及四角各布置标准品,看差异

  其中a 光源直接照射微孔板上:边缘效应明显

  b 逐孔移动式采光:无边缘效应,但需时常校正

  c 散射采光:边缘效应较明显,切换光源时需要光源组件移动

金思德生物:实时荧光定量PCR仪 采购要领!
网址:http://www.genesd.net.cn/gsnews/148.html

天津金思德生物技术有限公司

客服热线:022-84970393
李小姐 18920118658 18920795057

    Copyright 金思德生物 版权所有
    津ICP备17004513号-1
        金思德仪器维修网站                

在线客服系统