金思德生物:PCR仪的分类

  根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR,实时荧光定量PCR仪等几类。

  普通PCR仪

  一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。

  梯度PCR仪

  一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA片段其最适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。

  原位PCR仪

  是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。如病原基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。可保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA,还能标出靶序列在细胞内的位置。于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有着重大的实用价值。

  实时荧光定量PCR仪

  在普通PCR仪基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,只是在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。

  荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。

金思德生物:PCR仪的分类

  天津金思德生物技术有限公司率先研发出了利用物理方法达到热启动效果的PCR仪—E-1000,这是目前世界上唯一一款热启动PCR仪,并申报了国家知识产权发明专利。

  传统PCR反应中,反应体系各成分均是一次加入并进入循环,在反应温度由室温(25℃)上升至高温(94~95℃)过程中,可能发生引物错配和二聚体的形成,继而导致非特异性产物的扩增。业内最普遍的减少非特异性产物的方法是在PCR反应体系中加入热启动酶,从而达到优化目的产物扩增的目的。这种加入热启动酶的方法虽然实现了优化PCR反应的作用,但成本高,不利于整体试验经费的管理和使用。

  根据市场上现在出现的这种问题,我公司应市场需要研发了利用物理方法使PCR仪从物理角度来抑制非特异性产物的扩增,大大减少了试验成本,为下游试验提供了更大的发挥空间。

  主要性能及特点:

  1. 本仪器独具的热启动功能,在不使用昂贵的热启动酶的情况下,就可以有效地减少非特异性产物的产生,使实验达到理想的效果;

  2. 外观简洁明快;

  3. 触摸液晶大显示屏,坚固耐用、反应速度快;

  4. 样品基座配置为标准96孔基座,适用不同规格的PCR管,如96×0.2 ml PCR管、12×8联管、16×6联管或1块96孔PCR板等;

  5. 升温速度高达3.5℃/S,基座样品孔温度一致性好;

  6. 采用滑动下压式热盖,节省空间,且能有效压紧PCR管,防止样品蒸干;

  7. 断电重启功能,以保证实验的顺利进行;

  8. 温度梯度设置功能,可实现退火温度梯度优化,以确定最佳的退火温度,使实验获得最佳的结果。

金思德生物:PCR仪的分类
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