金思德生物:实时荧光定量PCR的特点

  1.特异性

  FQ-PCR具有引物和探针的双重特异性,故与传统的PCR相比,特异性大为提高。

  2.敏感性

  FQ-PCR的敏感度通常达100拷贝/ml,且线性范围很宽,为0-1011拷贝/ml。-般来讲,临床标木中病原体的数目为0-1010/拷贝,在此范围内FQ-PCR定量较为准确,标木不需稀释。

  3.重复性

  FQ-PCR结果相当稳定,同-标木的CT值相同,但其产物的荧光量却相差甚大。因为域值设置在指数扩增期,在此阶段,各反应组分浓度相对稳定,没有副作用,CT与荧光信号的对数旱线性关系。而当PCR反应进入平台期后,由于反应体系各组分的耗尽、酶活性的降低及产物的反馈抑制等原因导致产物不再增加。与终点法相比CT值能更稳定、更精确地反映起始模板的拷贝数。同时,因PCR是对原始待测核酸模板的-个扩增过程,任何十扰PCR指数扩增的因素如扩增孔间温度差异、标木中DNA聚合酶抑制剂的存在、加样的差异、待测标木中核酸模板的量等,都会影响扩增产物的量,因此,在扩增产物的数量与起始模板数量之间没有-个固定的比例关系,通过检测核酸产物很难对原始模板准确定量。

  4.降低产物污染的风险

金思德生物:实时荧光定量PCR的特点
网址:http://www.genesd.net.cn/hynews/130.html

天津金思德生物技术有限公司

客服热线:022-84970393
李小姐 18920118658 18920795057

    Copyright 金思德生物 版权所有
    津ICP备17004513号-1
        金思德仪器维修网站                

在线客服系统