PCR仪的使用方法

PCR仪的使用方法

  肯定会自带说明书的,而且要根据你目的片段的长度,引物的TM来设定延伸时间和一般来说PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:①的变性:经加热至90~95℃一定时间后,使双链或经形成的解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55~60℃,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在的作用下,于70~75℃,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按与原理,合成一条新的与模板DNA链互补的链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩扩增放大几百万倍。

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